一、介紹
分光光度計(jì),,又稱光譜儀(spectrometer),,是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器,。它的基本原理是建立在光與物質(zhì)相互作用的基礎(chǔ)上,,當(dāng)光子和溶液中的物質(zhì)分子相碰撞時(shí),就會(huì)發(fā)生吸收,,物質(zhì)對(duì)光的吸收是具有選擇性的,,通過測(cè)量其吸光度值的大小可反映某一物質(zhì)存在量的多少。
二,、分光光度計(jì)分類,。
1. 可見分光光度計(jì)
一種單光束分光光度計(jì),用來測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見光(400~760nm)的吸光度,,并對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析的儀器,。該儀器廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測(cè),、環(huán)保監(jiān)測(cè),、食品生產(chǎn)等領(lǐng)域。
2. 紫外-可見分光光度計(jì)
用來測(cè)量樣品對(duì)可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度,,并對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析,。該產(chǎn)品的光路可分為單光束,假雙光束和雙光束,,目前是使用多,、覆蓋面廣的分析儀器之一,在生命科學(xué),、材料科學(xué),、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué),、化學(xué)化工等多個(gè)領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用,。
3. 紅外分光光度計(jì)
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機(jī)化合物常用的光譜區(qū)域,,能分析各種狀態(tài)(氣,、液、固)的樣品,,具有快速,、樣品量少,,特征性強(qiáng)、不破壞樣品等特點(diǎn),。
4. 熒光分光光度計(jì)
用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,,可應(yīng)用于科研、化工,、醫(yī)藥,、生化、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn),、食品檢驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域。
5. 原子吸收分光光度計(jì)
主要適用于樣品中微量及痕量的組分分析,,是材料分析及質(zhì)量控制部門進(jìn)行常量,、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
三,、組成部分
A,、光源
在整個(gè)反映區(qū)域可發(fā)射連續(xù)光譜,具有穩(wěn)定和足夠長(zhǎng)的使用壽命,。常用光源有白熾燈(鎢絲燈,、鹵鎢燈等) ,氣體放電燈(氫燈、氘燈及氙燈等) ,金屬弧燈(各種汞燈)等,??梢姽鈪^(qū)主要用鎢燈(320~2500mm)、氙燈(180~375nm)為光源,,紫外區(qū)主要用氫,、氘燈。
B,、單色器
又稱波長(zhǎng)控制器,,其作用是將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光,并可從中選出一任波長(zhǎng)單色光的光學(xué)系統(tǒng),。來自光源的光線,,可直接通過單色器的狹縫,,照到分光部件上,。單色器的主要組件是玻璃棱鏡、復(fù)合濾光片或光柵,。
C,、樣品室
用于放置各種類型的吸收池(比色皿、比色杯)和相應(yīng)的池架附件,,根據(jù)其材質(zhì)可大致分為石英池,、玻璃池以及塑料池,,用于盛裝待測(cè)溶液和參比溶液。
d. 檢測(cè)器
利用光電效應(yīng),,將透過吸收池的光信號(hào)變成可測(cè)的電信號(hào),,并將電信號(hào)放大的裝置。常用的有光電池,、光電管或光電倍增管,。
E、結(jié)果顯示記錄系統(tǒng)(顯示器)
將光電管或光電倍增管放大的電流,,通過儀表顯示出來的裝置,,常用的顯示器有檢流計(jì)、數(shù)字顯示,、微機(jī)進(jìn)行儀器和記錄器等,,具有自動(dòng)控制和結(jié)果處理的功能。
四,、使用注意事項(xiàng)
1,、開機(jī)時(shí)需預(yù)熱,不使用時(shí),,不要點(diǎn)亮
2,、請(qǐng)勿拆卸單色器,吸收池使用后應(yīng)立即沖洗干凈,,用擦鏡頭紙或柔軟的棉織品擦干水分,,謹(jǐn)慎不要?jiǎng)潅y(cè)量時(shí)注意不要讓溶液濺入樣品室,。盛有溶液的吸收池也不要在樣品室放置太長(zhǎng)時(shí)間,。
3、光電器件要避免強(qiáng)光照射,、受潮,、集塵。檢測(cè)器保存干燥和絕緣性對(duì)儀器壽命有宜,。
4,、更換分光光度計(jì)光源燈時(shí),盡量不要用手直接接觸燈泡,,避免油污粘附,。如被油污黏附可以用無水乙醇擦除。
五,、應(yīng)用
1,、定性分析中測(cè)試物質(zhì)純度檢測(cè)、未知物的鑒定,、分子結(jié)構(gòu)中功能團(tuán)的推測(cè),、同分異構(gòu)體的判別,。
2、定量分析中單組分分析,、多組分分析,、有機(jī)元素分析、無機(jī)元素分析等,。
六,、相關(guān)品牌
日本 HITACHI 日立、美國(guó) Agilent 安捷倫,、美國(guó) Thermo Fisher 賽默飛世爾,、美國(guó) HACH 哈希、美國(guó) PerkinElmer 鉑金埃爾默,、METTLER TOLEDO 梅特勒-托利多,、美國(guó) BIO-RAD伯樂、德國(guó) Eppendorf 艾本德,、美國(guó) LabTech 萊伯泰科等,。其中日本日立、美國(guó)安捷倫的分光光度計(jì)通過其高靈敏度,、測(cè)量精準(zhǔn),、高穩(wěn)定性和操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),贏得了眾多科研人員的青睞,。